液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定畜禽肉中9種大環(huán)內(nèi)酯類和林可胺類藥物殘留量

時(shí)間：2023-03-25 06:13:38來(lái)源：food欄目：食品快速檢測(cè) 閱讀：

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定畜禽肉中9種大環(huán)內(nèi)酯類和林可胺類藥物殘留量

[db:作者] / 2022-12-12 00:00

6.2.1.1 適用范圍

適用于牛肉、豬肉、羊肉和雞肉中林可霉素、竹桃霉素、紅霉素、替米考星、泰樂(lè)菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素和交沙霉素殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。方法檢出限均為1.0μg/kg。

6.2.1.2 方法原理

畜禽肉中9種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(林可霉素、竹桃霉素、紅霉素、替米考星、泰樂(lè)菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素和交沙霉素)的殘留用乙腈提取，提取液用正己烷去除脂肪后濃縮，再用磷酸鹽溶液溶解后，經(jīng)OasisHLB固相萃取柱凈化，甲醇洗脫，洗脫液濃縮定容后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定。內(nèi)標(biāo)法定量。

6.2.1.3試劑和材料

甲醇、乙腈、正己烷：色譜純；甲酸銨、磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、氯化鈉：優(yōu)級(jí)純。氯化鈉溶液：2%。稱取10.0g氯化鈉，溶解于500mL水中。

磷酸鹽緩沖溶液：0.1mol/L 6.0g磷酸氫二鈉溶解于450mL水中，用氫氧化鈉飽和溶液調(diào)節(jié)pH=8，用水定容至500mL。使用前配制。

甲醇+水溶液(2+3，v/v)：400mL甲醇與600mL水混合。使用前配制。

甲酸銨溶液：0.1mmol/L。0.63g甲酸銨加水溶解至1000mL。

林可霉素、竹桃霉素、紅霉素、替米考星、泰樂(lè)菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉他霉素、交沙霉素和羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度≥95%。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：1.0mg/mL。準(zhǔn)確稱取每種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)10.0mg分別放入10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混勻。4℃保存。

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：10.0μg/mL。分別吸取0.1mL各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。4保存，可使用1周。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：1.0μg/mL。吸取1.0mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。用前配制。

內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液：1.0mg/mL。準(zhǔn)確稱取10.0mg羅紅霉素于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，混勻。4℃保存。

中間濃度內(nèi)標(biāo)溶液：10.0μg/mL。吸取0.1mL內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。4℃保存。

內(nèi)標(biāo)工作溶液：1.0μg/mL。吸取1.0mL中間濃度內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。用前配制。

基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別吸取1.0μL、2.0μL、5.0L、10.0μL、50.0μL混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，加入10.0μL內(nèi)標(biāo)工作溶液，用樣品空白提取液定容至1.0mL，配成1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL濃度系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。用前配制。

OasisHLB固相萃取柱：500mg，6mL，或相當(dāng)者。使用前，分別用10mL甲醇、10mL水、5mL氯化鈉溶液和5mL磷酸鹽緩沖溶液活化，保持柱體濕潤(rùn)。

濾膜：0.2um。

6.2.1.4儀器和設(shè)備

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源；天平：感量0.01g，0.0001g；固相萃取裝置；氮?dú)鉂饪s儀；具塞聚丙烯離心管：50mL；離心機(jī)。

6.2.1.5樣品前處理

(1)試樣制備

從全部樣品中取出有代表性樣品約1kg，充分?jǐn)囁椋靹?，均分成兩份，分別裝入潔凈容器內(nèi)。密封后作為試樣，標(biāo)明標(biāo)記。在抽樣和制樣的操作過(guò)程中，應(yīng)防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。將試樣于-18℃保存。

(2)提取

稱取5g試樣，精確至0.01g，置于50mL離心管中，加入10.0μL內(nèi)標(biāo)工作溶液和15.0mL乙腈，于振蕩器上劇烈振蕩10min。以4200r/min的轉(zhuǎn)速離心5min，取.上清液于另一離心管中，加入2.0g氯化鈉和10.0mL正已烷，于振蕩器.上劇烈振蕩10min。4200r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，小心吸取中間乙腈層12.0mL于另一-離心管中，用氮?dú)鉂饪s儀于55℃水浴中吹至近干。

(3)凈化

用7mL磷酸鹽緩沖溶液分兩次溶解殘液，使樣液以小于1.0mL/min的流速通過(guò)OasisHLB固相萃取柱。樣液全部流出后，再用10mL水和5mL甲醇+水溶液洗柱，棄去全部流出液，固相萃取柱用真空泵抽干1h。再用10mL甲醇洗脫于15mL錐形試管中，用氮?dú)鉂饪s儀于55℃水浴中吹至近干，準(zhǔn)確加入1.0mL甲酸銨溶液溶解殘?jiān)?。用陰性樣品，按上述步驟制備空白樣品提取液。過(guò)0.2um濾膜后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。

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